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真菌毒素是真菌在適宜條件下產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物，能夠引發(fā)人類、動(dòng)物各種急、慢性疾病主要威脅人類健康的真菌毒素種類有單端孢霉烯族類毒素、伏馬類毒素、赭曲霉類毒素等。目前，大部分的國家和地區(qū)都制定了糧食中真菌毒素*，我國也高度重視真菌毒素污染問題，在2015年新修訂的《食品安全法》中，將生物毒素明確列入重點(diǎn)關(guān)注的污染物質(zhì)中。我國也已經(jīng)制定了糧食中嘔吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（EN）、赭曲霉毒素（OTA）四種真菌毒素*，新的毒素*也在逐步制定完善中。據(jù)報(bào)道我國每年有3100萬噸糧食在生產(chǎn)、儲(chǔ)存、運(yùn)輸過程中被真菌污染，約占糧食年總產(chǎn)量的6.2%。為了保證我國糧食質(zhì)量安全，避免不必要的經(jīng)濟(jì)損失，及時(shí)快速監(jiān)測調(diào)查真菌毒素污染種類、水平及其風(fēng)險(xiǎn)尤為重要。

由于真菌毒素種類多樣，且存在協(xié)同污染，為確保全面、快速的了解糧食中真菌毒素的污染情況，迫切需要一種簡單、快速、靈敏、同時(shí)準(zhǔn)確測定糧食中多種真菌毒素的方法。目前真菌毒素的檢測方法主要有薄層色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。薄層色譜法程序復(fù)雜、可重復(fù)性和再現(xiàn)性差，基于抗原抗體相互作用的酶聯(lián)免疫吸附法雖有較高的選擇性，但無法準(zhǔn)確定量，同時(shí)由于前處理簡單，沒有有效的凈化，易受基質(zhì)干擾，產(chǎn)生假陽性。

本文使用賽默飛液相色譜儀Dionex Ultimate 3000和三重四極桿質(zhì)譜儀TSQ Endura MS/MS聯(lián)用測定16 種真菌毒素的方法。該方法在16 min 內(nèi)完成16 種常見真菌毒素的分離。

儀器條件

色譜條件

色譜柱：Thermo Scientific Hypersil Gold aQ 100 x 2.1 mm, 1.9 µm

貨號(hào)  25302-102130

流動(dòng)相：

A: 5 mM NH4Ac + 0.5% acetic acid in water

B: 5 mM NH4Ac + 0.5% acetic acid in methanol

進(jìn)樣量：10μL/ 20μL

流速：400μL/min

質(zhì)譜條件

Ion Source type: HESI

Detection Mode: t-SRM

Spray voltage positive: 3500 V

Spray voltage negative: 2500 V

Sheath gas: 45

Aux gas: 15

Sweep gas: 1

Ion transfer tube (T): 340 °C

Vaporizer (T): 350 °C

結(jié)論

本文采用液質(zhì)連用法測定糧食中16種重要真菌毒素，涵蓋目前國內(nèi)外已設(shè)定*的真菌毒素。使用Hypersil Gold aQ 100 x 2.1 mm, 1.9 µm色譜柱進(jìn)行分析，16min內(nèi)對(duì)16種真菌毒素完成分離，峰型對(duì)稱，分析速度快，靈敏度高，重現(xiàn)性好。